Vortexing РНКңызды кырып салбайт, эгер сиз кокус RT кылып жатсаңыз, аны жараксыз абалга калтырбайт - эгер сиз узун mRNAны клондоңуз келсе гана. Invitrogen техникалык колдоосу да туура. Хлороформ Тризолдон оор жана түтүктүн түбүнө чөгүп кетет.
РНКны айлануу коопсузбу?
Тризол лизаттарын же РНК үлгүлөрүн кыркып жибербөө үчүн айлантпаңыз. Экстракциялоодон кийин РНК үлгүлөрүн дайыма муздун үстүндө сактаңыз. Бул протокол 1,5 же 2 мл түтүктө 1 мл Тризол лизиленген үлгүлөр үчүн иштелип чыккан.
РНКны жылыта аласызбы?
Ошондуктан, жогорку температуралардан качыңыз ( +65°C жогору) анткени бул РНКнын бүтүндүгүнө таасир этет. Анын ордуна, экинчилик структураларды эритүү үчүн денатурациялоочу буферлердин катышуусунда РНКны +65°Cге чейин 15 мүнөт ысытыңыз.
РНК гранулдарын кантип кайра суспензия кыласыз?
пелетиңизди жылуу суу менен кайра суспендеңиз (40-50°С). 45°Сте 10 мүнөт инкубациялоо. аларды 4-6 саатка +4 коюңуз.
РНКны кантип туташтырасыз?
A.
Туз концентрациясы тууралангандан кийин, РНКны 2,5 көлөм этанол же 1 көлөм изопропанол кошуу жана жакшылап аралаштырууменен чөктүрсө болот, андан кийин -20°Cде кеминде 15 мүнөт муздатуу керек.
