Пигменттерди бөлүп алуу үчүн хлоропласттар изоляция буферинде суспензияланган. Хлоропласттардан пигменттерди бөлүп алуу үчүн алгач буферден кутулуубуз керек. Хлоропласттарды буферден ажыратуунун эң жакшы жолу кайсы? бөлүү үчүн центрифуганы колдонуңуз
Хлоропластты кантип изоляциялайсыз?
Хлоропласттарды изоляциялоо методунда клетка дубалы блендер же гомогенизатор аркылуу механикалык жол менен талкаланат. Андан кийин үзүлбөгөн жалбырак ткандары жана клеткалык калдыктар фильтрация жолу менен жок кылынат. Хлоропласттар перколл градиентинин жардамы менен центрифугалоо жолу менен чогултулат.
Хлоропласттарды изоляциялоо буферин кантип жасайсыз?
2X буфердик запасты 1:1 dH2O суусу менен суюлтуу аркылуу 1X хлоропласт изоляция буферинин керектүү көлөмүн даярдаңыз 1X хлоропласттын млине 10 мкл 10% BSA эритмесин кошуңуз Изоляция буфери. Колдонуунун алдында 1 мл хлоропласт изоляция буферине 1 мкл DTT кошуңуз. Бул буферди "Толук буфер" деп белгилеңиз.
Хлоропласттарды изоляциялоо буферинде эмне бар?
ДНК изоляция буфери 100 mM NaCl, 100 mM Tris-HCl (pH 8.0), 50 mM EDTA жана 1 mM DTT турат. 8 мл ДНК изоляция буфери, 1,5 мл 20% SDS, 20 мкл 2-Меркаптоэтанол жана 30 мкл Протеиназа К (10 мг/мл) менен хлоропласт таблеткасын 55°C центрифугалык түтүккө 4 саат бою.
Хлоропласттарды изоляциялоо протоколунда шпинат жалбырагын гомогенизациялоо үчүн колдонулган буфердин рНы кандай?
Шпинат жакшы хлоропласттарга бай жана алар оңой изоляцияланат. Жалбырактар жарылып кетпеши үчүн 0,1 М фосфат буфери, pH 7,5 жана 0,5 М сахароза менен муздак блендерге салышыңыз керек.
