Төмөндө кыйыр иммунофлуоресценттик боёо протоколунун ар кандай кадамдарына жалпы сереп берилди
- Экспериментти пландаштыруу жана үлгүлөрдү даярдоо. …
- Үлгү бекитүү. …
- Клетка өткөрүү. …
- Бөгөттөө. …
- Негизги антитело инкубациясы. …
- Экинчи даражадагы антитело инкубациясы. …
- Контракт жана Монтаждоо.
Сиз иммунофлуоресценцияны кантип аткарасыз?
Бардык инкубация кадамдары бөлмө температурасында өтөт
- Клеткаларды эки жолу жууп, кычкачтын жардамы менен нымдалган камерага өйдө каратылган клеткалар менен жабышчаакты кылдаттык менен салыңыз.
- 4% формальдегид менен 10 мүнөт бекитип, 3 × жууп коюңуз.
- 0,1 % TX-100/PBS менен 15–20 мүнөткө өткөрөт жана 3 × жуу.
Клеткада иммунофлуоресценцияны кантип колдоносуз?
Жабылган клеткалар үчүн иммунофлуоресценция протоколу
- 500 мл маданият чөйрөсүндө 4 камералуу слайддын ар бир кудугуна 1–1,5 x104 урук. 37°C, 5% CO2.
- Клетка себилгенден 32–36 саат өткөндөн кийин, клетканын маданият чөйрөсүн алып салыңыз жана 500 мкл 1X PBS менен клеткаларды 3 жолу чайкаңыз.
Иммунофлуоресценциянын мисалы кандай?
Мисалы, изилдөөчү эчкиде бир нече антигендерди тааныган биринчи антителолорду түзүп, андан соң эчкинин антителосунун туруктуу аймагын тааныган боёк менен байланышкан коёндун экинчилик антителолорун колдоно алат ( коён текеге каршы антителолор).
Иммунофлуоресценттик боёо эмне үчүн колдонулат?
Иммунофлуоресценция (IF) менен боёо - бул биологиялык изилдөөдө жана клиникалык диагностикада кеңири колдонулган техника IF атайын максаттуу антигендерди аныктоо үчүн флуоресценттик белгиленген антителолорду колдонот. Сүрөт тартуудан кийин, бул өтө түз ыкма, анткени сиз бир нерсени көрө аласыз.
