Колдонуу учурунда (20-30 мин) музда сакталган RIPA буферин 2-3 жолу тоңдуруп, эритсе болот. Буферди тоңдурулган абалда -80 градуста сактаңыз.
RIPA буферин канча убакыт сактай алам?
1. Буфер үзгүлтүксүз колдонула турган болсо, 10x буферди 1-2 апта бою 4°C температурада сактоо сунушталат. Узак мөөнөткө буферди -20°С температурада сактоо керек. Көптөгөн кичинекей эксперименттер аткарыла турган болсо, 10x буферди бөлүү сунушталат.
RIPA буферин сактаса болобу?
Даярдалган RIPA буферин бөлүп алуу жана −20°C температурада сактоо керек. Протеазаны жана/же фосфатаза ингибиторлорун дароо колдонуудан мурун эриген аликвотка кошуңуз. Бир миллилитр буфер болжол менен 5 миллион клетканы лизиске жетет. …
RIPA лизаттарын кантип сактайсыз?
Даярдалган лизаттарды мүмкүн болушунча тезирээк колдонуңуз жана мүмкүн болушунча кыска убакытка сактаңыз. Лизаттарды - 80℃ деңгээлинде мүмкүн болушунча узакка сактаңыз. Узак мөөнөткө сакталышы керек болгон лизаттар үчүн жаңы даярдалган түтүктөрдү деградацияга жол бербөө үчүн жеткиликтүү -80℃ тоңдургучка которуңуз.
RIPA буферин кантип эритесиз?
Клеткалардан акыркы жуу эритмеси алынып салынгандан кийин, клетка таблеткаларына RIPA буферинин тиешелүү көлөмүн (0,5тен 5 × 107 клеткага 1 мл) кошуп, клеткаларды толугу менен кайра суспензиялоо үчүн кыска убакытка аралаштырыңыз же вортекстеңиз. Музда же муздаткычта (2–8 °C) беш мүнөткө инкубациялаңыз.
