Бимолекулярдык флуоресценттик толуктоо (BiFC) анализи жандуу клетканын сүрөтүн же туруктуу клеткаларды колдонуп in vivo протеин менен протеиндин өз ара аракеттенүүсүн түздөн-түз визуализациялоо үчүн колдонулган ыкма. … BiFC биринчи жолу Ху жана башкалар тарабынан сүрөттөлгөн.
Бимолекулалык флуоресценцияны толуктоо кантип иштейт?
BiFCнин иштөө принциби флуоресценттик протеиндин эки сегментинин биригүүсүнүн натыйжасында флуоресценттик комплексти өнүктүрүүгө негизделген, алар фрагменттерде протеин-белоктун өз ара аракеттешүүсүнөн улам жакын жерде болгондо, б.а., BiFCде флюорофор амино жана карбоксил терминалдарына бөлүнөт.
BiFC тести деген эмне?
бимолекулярдык флуоресценция толуктоосу (BiFC) анализи тирүү клеткалардагы протеиндердин өз ара аракеттенүүсүн жөнөкөй жана түз визуалдаштырууга мүмкүндүк берет (45). BiFC мамилеси флуоресценттүү протеиндин флуоресценттүү эмес фрагменттерине кошулган эки протеин бири-бири менен өз ара аракеттенгенде флуоресценттик комплекстин пайда болушуна негизделген (сүрөт
BiFC тести эмне үчүн жасалат?
BiFC идеясы кызыккан белокторуңузга кошулган GFP жарымын экспрессиялоо болуп саналат Эгерде POIлер өз ара аракеттенсе, функционалдык GFP алуу үчүн эки жарымды тең бириктирсеңиз болот. Демек, эгер клеткада GFPдин жарымы бар болсо, GFP антителосу аны аныктай алганына таң калбайм.
BiFC кайтарылабы?
BiFC комплекстеринин кайтарылбастыгы жакшы документтештирилген (10) жана флуоресценттүү протеин негизиндеги BiFC тутумдарынын көбү, эгерде баары болбосо да, кайра кайтарылгыс болуп көрүнөт (8, 33, 43, 48–51).