Logo ky.boatexistence.com

Эмне үчүн компетенттүү клеткалар муз үстүндө сакталышы керек?

Мазмуну:

Эмне үчүн компетенттүү клеткалар муз үстүндө сакталышы керек?
Эмне үчүн компетенттүү клеткалар муз үстүндө сакталышы керек?

Video: Эмне үчүн компетенттүү клеткалар муз үстүндө сакталышы керек?

Video: Эмне үчүн компетенттүү клеткалар муз үстүндө сакталышы керек?
Video: ЭС ТУТУМДУ ЖАКШЫРТУУ ҮЧҮН БЕШ КЕҢЕШ 2024, Май
Anonim

Аларды СУКТУН сакта! Компетенттүү клеткаларды жасоо процесси клеткалардын муздак болушун талап кылгандыктан, татаал. Бул абдан маанилүү, анткени клеткалар компетенттүү кылып жасалып жатканда абдан сезимтал жана морт болот Температураны төмөн кармап туруу иштетүү учурунда клетканын өлүшүнө жол бербөөгө жардам берет.

Трансформация эксперименти учурунда эмне үчүн реакциялар музда сакталат?

Плазмида-клетка аралашмасы андан кийин кыска убакытка 45–50°Cге чейин ысытылат, бул ДНКнын бузулган мембрана аркылуу клеткага киришине мүмкүндүк берет. Андан кийин ысытылган аралашма бактериялардын ичиндеги плазмидаларды кармап калуу үчүн кайра музга коюлат … Плазмиддик ДНК эритмесинде өтө көп туз бар болсо, жаа пайда болуп, трансформацияны начарлатат.

Эмне үчүн түтүктөрдү муздун үстүнө коёсуз?

Эмне үчүн түтүктөрдү муздун үстүнө койдук деп ойлойсуз? Бактерияга ДНКны алуу үчүн, биз аларга химиялык кальций хлориди (CaCl2) менен тешиктешибиз керек. … ДНКнын ичине кириши үчүн жасалган тешиктер бактериялардын агып кетишине жол ачат. Аларды муз үстүндө кармабасак, алар "кансырап" өлүп калышат.

Муз муздак кальций хлоридинин компетенттүү клеткаларды даярдоодо ролу кандай?

Кальций хлоридинин жылуулук-шок трансформация процесси бактериялык клеткаларды курчап турган чөйрөдөн ДНКны кабыл алууга түрткү берет. … Муздай муздак CaCl2 эритмеси ДНКны клетканын бетине байланыштырат, ал андан кийин кыска мөөнөттөгү жылуулук шокунан кийин клеткага кирет (3).

Компетенттүү клеткаларды кантип сактайсыз?

Компетенттүү клеткалар - 80°C температурада сакталышы керек. -20°Cде сактоо трансформация эффективдүүлүгүнүн (TE) олуттуу төмөндөшүнө алып келет. NEB 5-alpha Competent E. coli (NEB C2987H) менен сыналганда, клеткалар -20°Cде 24 саат сакталгандан кийин 94,5% TE жоготушкан.

Сунушталууда: